歐際醫(yī)藥依托擁有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心進(jìn)行合作，為您提供主要包括模型制備、受試物給藥、標(biāo)本采集、功能指標(biāo)檢測(cè)等技術(shù)服務(wù)。

服務(wù)目錄號(hào)：#OGF-018

服務(wù)項(xiàng)目：輔助保護(hù)胃黏膜

服務(wù)內(nèi)容：

1.急性胃粘膜損傷無水乙醇模型、急性胃粘膜損傷消炎痛模型、慢性胃潰瘍模型（任選其一）

2.選用SD或Wistar 健康大鼠，單一性別，180－220 克，每組 8－12 只。

3.受試物設(shè)三個(gè)劑量組，其中一個(gè)應(yīng)為人體推薦量的5 倍劑量組，并同時(shí)設(shè)置正常對(duì)照組。不同的損傷模型，還應(yīng)設(shè)置相應(yīng)的模型對(duì)照組。慢性潰瘍模型應(yīng)先造模，手術(shù)次日再分組。受試樣品給予時(shí)間一般為14 —30 天，必要時(shí)可以延長至 45 天。

4.結(jié)果判定：數(shù)據(jù)可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F 值，F(xiàn) 值<F0.05，結(jié)論：

各組均數(shù)間差異無顯著性。F 值≥F0.05，即 P≤0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。受試物一個(gè)或一個(gè)以上劑量組與模型對(duì)照組比較，急性胃粘膜損傷模型大體觀察評(píng)分或大體觀察評(píng)分與病理組織學(xué)檢查評(píng)分顯著降低，慢性胃潰瘍模型的潰瘍面積和/或體積顯著減小，表明胃粘膜損傷明顯改善，可判定該受試樣品動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽性。

客戶提供：受試樣品、陽性對(duì)照品

歐際提交：詳細(xì)研究報(bào)告

服務(wù)周期：3個(gè)月

服務(wù)目錄號(hào)：#OGF-018-1

模型名稱：急性胃粘膜損傷無水乙醇模型

動(dòng)物隨機(jī)分空白對(duì)照組、模型組和受試樣品三個(gè)劑量組。各劑量組灌胃樣品30 天后，全部動(dòng)物嚴(yán)格禁食24 小時(shí)（不禁水），此期間亦禁止給予受試物。除空白對(duì)照外，所有試驗(yàn)組動(dòng)物給予無水乙醇1.0mL/只，1 小時(shí)后處死動(dòng)物，暴露完整胃，結(jié)扎幽門，灌注適量 10%福爾馬林溶液，固定 20min，然后沿胃大彎剪開，洗凈胃內(nèi)容物，展開胃粘膜，在體視解剖顯微鏡下或肉眼下用游標(biāo)卡尺測(cè)量出血點(diǎn)或出血帶的長度和寬度。因?qū)挾人頁p傷的嚴(yán)重性遠(yuǎn)較長度大，故雙倍積分。其評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表1

觀察指標(biāo)：各實(shí)驗(yàn)組胃粘膜損傷程度以損傷發(fā)生率（%）、損傷積分指數(shù)和損傷抑制率（%）表示。損傷發(fā)生率（%）=某組出現(xiàn)出血或潰瘍的大鼠數(shù)量／該組大鼠數(shù)量×100%；損傷積分指數(shù) = 組損傷評(píng)分總和／組動(dòng)物數(shù)量；損傷抑制率（%）= (A-B)/A′100%（A、B 分別為模型組與試驗(yàn)組的損傷積分）。

組織病理學(xué)觀察及評(píng)分：大體檢查完畢，將每只動(dòng)物胃粘膜損傷最嚴(yán)重的部位切下，固定于10%甲醛溶液，常規(guī)制片，HE 染色，鏡下觀察。注意選擇胃粘膜正橫切面，包括粘膜全層的區(qū)域觀察。評(píng)分方法：以充血、出血、粘膜細(xì)胞變性壞死在整個(gè)粘膜上皮層的累及程度分為5 級(jí)。充血權(quán)重為 1，出血權(quán)重為 2，上

皮細(xì)胞變性壞死權(quán)重為3，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)及病變總積分公式見表 2。

表2 急性胃粘膜損傷組織病理學(xué)檢查評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

服務(wù)目錄號(hào)：#OGF-018-2

模型名稱：急性胃粘膜損傷無水乙醇模型

動(dòng)物隨機(jī)分空白對(duì)照組、模型組和受試樣品三個(gè)劑量組，灌胃給予動(dòng)物受試物30 天后，禁食不禁水24 小時(shí)，模型組和劑量組給予消炎痛 40mg/kg 一次性腹腔注射。5 小時(shí)后處死動(dòng)物，剖腹將胃取出，結(jié)扎幽門和賁門，從十二指腸與幽門部結(jié)合處注入10%甲醛溶液 5 mL，固定 20 分鐘后，沿胃大彎剪開，洗凈胃內(nèi)容物，展開胃粘膜，用紙吸干，觀察胃粘膜損傷程度。用游標(biāo)卡尺測(cè)量胃出血或潰瘍的最大長度及寬度，以出血或潰瘍的最大長寬徑作為損傷指標(biāo)評(píng)分。消炎痛所致胃粘膜損傷的潰瘍一般較小，肉眼觀查以點(diǎn)狀多見，其評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表3

觀察指標(biāo)：各實(shí)驗(yàn)組胃粘膜損傷程度以損傷發(fā)生率（%）、損傷指數(shù)和損傷抑制率（%）表示。損傷發(fā)生率（%）= 某組出現(xiàn)出血或潰瘍的大鼠數(shù)量／該組大鼠數(shù)量×100%；損傷指數(shù) = 組損傷評(píng)分總和／組動(dòng)物數(shù)量；損傷抑制率（%）=(A-B)/A′100%（A、B 分別為模型組與試驗(yàn)組的損傷積分）。

組織病理學(xué)觀察及評(píng)分：同急性胃粘膜損傷無水乙醇模型。

服務(wù)目錄號(hào)：#OGF-018-3

模型名稱：慢性胃潰瘍模型

醋酸注射法：將動(dòng)物禁食不禁水24 小時(shí)，乙醚或水合氯醛或戊巴比妥鈉麻醉后，消毒腹部，于劍突下切開腹腔，將胃輕拉出腹腔外，用微量注射器于胃幽門處漿膜下注射20－30mL 的 30%冰醋酸，縫合切口，術(shù)后正常喂食和水。第二天將手術(shù)后狀態(tài)良好的動(dòng)物按體重隨機(jī)分為模型組和受試樣品三個(gè)劑量組。各

劑量組按相應(yīng)劑量灌胃，連續(xù)14 天。模型組灌胃蒸餾水或溶劑。禁食 24 小時(shí)后處死，取出整個(gè)胃浸泡于 10%的福爾馬林溶液內(nèi)，浸泡20 分鐘后沿胃大彎剪開，洗凈內(nèi)容物，取腺胃區(qū)展開平鋪于玻璃板上，用紙吸干潰瘍內(nèi)的水分，測(cè)量其面積和體積。潰瘍面積和體積測(cè)量法：于帶標(biāo)尺的解剖顯微鏡下計(jì)數(shù)潰瘍所占的方格數(shù)，換算成面積。然后用微量注射器將有色墨水注入潰瘍內(nèi)，將潰瘍填滿與周邊平齊，讀取微量注射器上刻度即為潰瘍的體積。1.4.3.3.2 冰醋酸浸漬法：將動(dòng)物禁食不禁水 24 小時(shí)，乙醚、異氟烷、巴比妥鈉或水合氯醛麻醉后實(shí)施剖腹手術(shù)，消毒腹部，于劍突下切開腹腔，將牛津杯（內(nèi)徑5mm、長 10mm）垂直放置胃體部粘膜上，向管腔加入冰醋酸0.2mL，1.5 分鐘后用棉簽蘸出冰醋酸，縫合手術(shù)切口，術(shù)后正常喂食和水，第二天將手術(shù)后狀態(tài)良好的動(dòng)物按體重隨機(jī)分組、給藥，動(dòng)物處置和測(cè)量等操作同上。