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歐際醫(yī)藥依托擁有實(shí)驗(yàn)動物使用許可證的實(shí)驗(yàn)動物中心進(jìn)行合作,為您提供主要包括模型制備、受試物給藥、標(biāo)本采集、功能指標(biāo)檢測等技術(shù)服務(wù)。
服務(wù)目錄號:#OGF-016
服務(wù)項(xiàng)目:有助于消化功能評價
服務(wù)內(nèi)容:
1.促進(jìn)消化功能動物實(shí)驗(yàn)包括大鼠體重、體重增重、攝食量和食物利用率實(shí)驗(yàn);小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn);消化酶的測定等三部分。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目可選用單一性別成年小鼠或大鼠。小鼠18-22 克,每組 10-15 只,大鼠 120-150 克,每組8-12 只。
3.實(shí)驗(yàn)設(shè)三個劑量組和一個陰性對照組(或空白對照組),以人體推薦量的10 倍(小鼠)或 5 倍(大鼠)為其中的一個劑量組,另設(shè)二個劑量組,必要時設(shè)陽性對照組和模型對照組。受試樣品給予時間30 天(小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)受試樣品給予時間15-30 天),必要時可延長至 45 天。
客戶提供:受試樣品、陽性對照品
歐際提交:詳細(xì)研究報告
服務(wù)周期:3個月
服務(wù)目錄號:#OGF-016-1
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1.體重、體重增重、攝食量和食物利用率
選用同一性別的大鼠。實(shí)驗(yàn)開始時動物體重的差異應(yīng)不超過平均體重的10%。分不同劑量實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組,經(jīng)口給予受試樣品,每周測2 次體重和食物攝入量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時計算體重、體重增重、攝食量和食物利用率。
2.小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)
選用同一性別的小鼠,分不同劑量實(shí)驗(yàn)組、空白對照組和模型對照組,模型對照組用復(fù)方地芬諾酯(或洛哌丁胺2~4mg/kg BW)造模??捎媚蛱磕┘影⒗畼淠z作為指示劑。經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前禁食不禁水16 小時,于測定當(dāng)天各實(shí)驗(yàn)組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水,30 分鐘后
各實(shí)驗(yàn)組和模型對照組給予復(fù)方地芬諾酯(0.025%-0.05%),空白對照組給予蒸餾水,30 分鐘后各組再給予指示劑,25 分鐘后斷頸處死動物,計算墨汁推進(jìn)率。
按下式計算墨汁推進(jìn)率:墨汁推進(jìn)長度(cm)、墨汁推進(jìn)率=×100%、小腸總長度(cm)
3.消化酶的測定
選用同一性別的大鼠。分不同劑量實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組,實(shí)驗(yàn)開始時動物體重的差異應(yīng)不超過平均體重的10%。經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前各組動物禁食不禁水 24 小時,采用乙醚(或異氟烷)麻醉大鼠幽門結(jié)扎法收集一定時間內(nèi)排出的胃液,測定單位時間內(nèi)胃液量。取胃液1mL 放入 50mL 的三角燒瓶中,加入
0.05mol/L 鹽酸溶液 15mL 搖勻,放入新鮮制作的蛋白管兩根。塞好瓶口,在 37℃恒溫箱中孵育 24 小時,取出蛋白管,用尺測量蛋白管兩端透明部分的長度(mm),以四端之值求其平均值。計算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。
胃蛋白酶活性單位(μ/mL)=四端蛋白管透明部分長度均值 2×16
胃蛋白酶排出量(μ/h)=胃蛋白酶活性×每小時胃液量
4.數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定
計量資料可用方差分析,但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),方差齊,計算F 值,F(xiàn) 值<F0.05,
結(jié)論:各組均數(shù)間差異無顯著性;F 值≥F0.05,P≤0.05,用多個實(shí)驗(yàn)組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法
進(jìn)行統(tǒng)計;對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊要求后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)
進(jìn)行統(tǒng)計;若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的,改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計。
食物利用率和墨汁推進(jìn)率資料需進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換,X=Sin-1 p ,式中 P 為食物利用率和墨汁推進(jìn)率,用小數(shù)表示,然后再進(jìn)行方差分析。
5.體重、體重增重、攝食量和食物利用率
實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組比較,體重、體重增重、攝食量三項(xiàng)指標(biāo)中任一指標(biāo)增加,經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性,且食物利用率與陰性對照組比較不明顯降低,可判定該實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
6.小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)
在模型成立的前提下,實(shí)驗(yàn)組與模型對照組比較,墨汁推進(jìn)率增加,經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性,可判定該實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
7.消化酶的測定
實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組比較,胃液量、胃蛋白酶活性,胃蛋白酶排出量三項(xiàng)指標(biāo)中任一指標(biāo)增加,經(jīng)統(tǒng)計
處理差異有顯著性,可判定該實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
結(jié)果判定
動物體重、體重增重、攝食量、食物利用率,小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)和消化酶測定三方面中任二方面實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性,可判定該受試樣品動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性
歐際醫(yī)藥依托擁有實(shí)驗(yàn)動物使用許可證的實(shí)驗(yàn)動物中心進(jìn)行合作,為您提供主要包括模型制備、受試物給藥、標(biāo)本采集、功能指標(biāo)檢測等技術(shù)服務(wù)。
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服務(wù)項(xiàng)目:有助于消化功能評價
服務(wù)內(nèi)容:
1.促進(jìn)消化功能動物實(shí)驗(yàn)包括大鼠體重、體重增重、攝食量和食物利用率實(shí)驗(yàn);小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn);消化酶的測定等三部分。
2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目可選用單一性別成年小鼠或大鼠。小鼠18-22 克,每組 10-15 只,大鼠 120-150 克,每組8-12 只。
3.實(shí)驗(yàn)設(shè)三個劑量組和一個陰性對照組(或空白對照組),以人體推薦量的10 倍(小鼠)或 5 倍(大鼠)為其中的一個劑量組,另設(shè)二個劑量組,必要時設(shè)陽性對照組和模型對照組。受試樣品給予時間30 天(小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)受試樣品給予時間15-30 天),必要時可延長至 45 天。
客戶提供:受試樣品、陽性對照品
歐際提交:詳細(xì)研究報告
服務(wù)周期:3個月
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實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1.體重、體重增重、攝食量和食物利用率
選用同一性別的大鼠。實(shí)驗(yàn)開始時動物體重的差異應(yīng)不超過平均體重的10%。分不同劑量實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組,經(jīng)口給予受試樣品,每周測2 次體重和食物攝入量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時計算體重、體重增重、攝食量和食物利用率。
2.小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)
選用同一性別的小鼠,分不同劑量實(shí)驗(yàn)組、空白對照組和模型對照組,模型對照組用復(fù)方地芬諾酯(或洛哌丁胺2~4mg/kg BW)造模??捎媚蛱磕┘影⒗畼淠z作為指示劑。經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前禁食不禁水16 小時,于測定當(dāng)天各實(shí)驗(yàn)組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水,30 分鐘后
各實(shí)驗(yàn)組和模型對照組給予復(fù)方地芬諾酯(0.025%-0.05%),空白對照組給予蒸餾水,30 分鐘后各組再給予指示劑,25 分鐘后斷頸處死動物,計算墨汁推進(jìn)率。
按下式計算墨汁推進(jìn)率:墨汁推進(jìn)長度(cm)、墨汁推進(jìn)率=×100%、小腸總長度(cm)
3.消化酶的測定
選用同一性別的大鼠。分不同劑量實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組,實(shí)驗(yàn)開始時動物體重的差異應(yīng)不超過平均體重的10%。經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前各組動物禁食不禁水 24 小時,采用乙醚(或異氟烷)麻醉大鼠幽門結(jié)扎法收集一定時間內(nèi)排出的胃液,測定單位時間內(nèi)胃液量。取胃液1mL 放入 50mL 的三角燒瓶中,加入
0.05mol/L 鹽酸溶液 15mL 搖勻,放入新鮮制作的蛋白管兩根。塞好瓶口,在 37℃恒溫箱中孵育 24 小時,取出蛋白管,用尺測量蛋白管兩端透明部分的長度(mm),以四端之值求其平均值。計算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。
胃蛋白酶活性單位(μ/mL)=四端蛋白管透明部分長度均值 2×16
胃蛋白酶排出量(μ/h)=胃蛋白酶活性×每小時胃液量
4.數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定
計量資料可用方差分析,但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),方差齊,計算F 值,F(xiàn) 值<F0.05,
結(jié)論:各組均數(shù)間差異無顯著性;F 值≥F0.05,P≤0.05,用多個實(shí)驗(yàn)組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法
進(jìn)行統(tǒng)計;對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊要求后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)
進(jìn)行統(tǒng)計;若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的,改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計。
食物利用率和墨汁推進(jìn)率資料需進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換,X=Sin-1 p ,式中 P 為食物利用率和墨汁推進(jìn)率,用小數(shù)表示,然后再進(jìn)行方差分析。
5.體重、體重增重、攝食量和食物利用率
實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組比較,體重、體重增重、攝食量三項(xiàng)指標(biāo)中任一指標(biāo)增加,經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性,且食物利用率與陰性對照組比較不明顯降低,可判定該實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
6.小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)
在模型成立的前提下,實(shí)驗(yàn)組與模型對照組比較,墨汁推進(jìn)率增加,經(jīng)統(tǒng)計處理差異有顯著性,可判定該實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
7.消化酶的測定
實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組比較,胃液量、胃蛋白酶活性,胃蛋白酶排出量三項(xiàng)指標(biāo)中任一指標(biāo)增加,經(jīng)統(tǒng)計
處理差異有顯著性,可判定該實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。
結(jié)果判定
動物體重、體重增重、攝食量、食物利用率,小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)和消化酶測定三方面中任二方面實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性,可判定該受試樣品動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性